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动物性食品蛋白质测定方法的改进

作者:代写论文  来源:星论文网  发布时间:2007-12-06 15:26:41
食品中的蛋白质含量是衡量食品品质、营养价值的重要指标,是常规理化检测中必须测定的指标。凯氏定氮法是粗蛋白测定的经典方法,具有测定结果准确度和精密高度等优点,迄今为止一直作为国内外的标准方法。其基本原理是将食品与硫酸和催化剂一同加热消化,使蛋白质分解,分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵。然后碱化蒸馏是氨游离,用硼酸吸收后再以硫酸或盐酸标准溶液滴定,根据酸的消耗量乘以换算系数,即为蛋白质含量。
    目前,国际法中消化时用硫酸铜和硫酸钾作化学剂,加浓硫酸直接消化,此法用酸量大,消耗时间长,消化程度不易掌握。一般情况下,动物性食品蛋白质测定中,消化时间要比植物性长,且不同种类的动物性食品的消化时间也不一样。
    据沈建明报道,蛋白质中总氮的消化速度为7.6mgN/h,猪肉的总氮约为2.4%,按国标法称取1.500g(约36mgN)鲜肉样进行消化,需4.7h才能消化完全,如此长的消化时间增加了测定工作人力和物力的投资。近年来,有人对测定方法进行了改进,提高了同H2O2+H2SO4,以硒粉取代硫酸铜,或用氧化汞取代硫酸铜等,并经验证明方法的可能性。然而,硒粉和氧化汞是有毒物质 ,消化时放出的气体会对环境造成污染。H2O2时一种强氧化剂(标准氧化还原电位EQ=1.77),比O2高,可大大加速有机物的氧化,促进反应的完全,并且不会对环境造成污染。目前,有多篇用H2O2改进粗蛋白测定的报道,但方法各异。用用冷加法,也有用加热法,且各种方法的H2O2和H2SO4的加入量也不同,笔者认为,虽然加热法消化速度比冷加法快,但存在一定危险,且不适于消化大批量样品,所以本文主要探讨冷加热法中,H2O2与H2SO4的添加量对消化速度的影响。
1. 材料与方法
  1.1仪器与试剂
    1.1.1仪器
      凯氏定氮装置,电炉,消化管,酸式滴定管,分析天平
    1.1.2试剂
    硫酸铜,硫酸钾,硫酸,2%硼酸,40%氢氧化钠溶液,0.05N硫酸标准溶液或0.05N盐酸标准溶液,混合指示液:1份0.1%甲基红乙醇溶液与5份0.1%溴甲酚绿乙醇溶液临用时混合,也可以用2份0.1%甲基红乙醇溶液与1份0.1%次甲基蓝乙醇溶液临用时混合。无水碳酸钠。以上试剂均匀为无氮化合物,纯度为分析纯。
2.实验操作
  2.1实验方法的设计
  本实验根据文献中的相关内容,对H2O2与H2SO4的不同添加量设置了以下四种方法对四种肉样进行测定。(A为国标法,B、C、D为改进法)
       表1     H2O2与H2SO4的添加量
方法                A  B     C     D
H2O2:H2SO4(体积比)0:20      2:3 &nb

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