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酶联免疫吸附法在肉制品快速检测中的应用

作者:代写论文  来源:星论文网  发布时间:2007-12-06 15:26:42
 酶联免疫吸附法是一种基本的酶免疫分析方法,它始于1971年Engval用碱性磷酸()酶标记的1Gg测定1gG,随后这种方法得到迅速发展和不断完善。由于ELISA具有选择性好、灵敏度高、结果判断客观准确、实用性强等优点,目前已广泛应用于临床医学、生物学和分析化学等领域。在食品领域,由于其快速,特异性强的特点,也迅速的得到认可,特别是在检验检疫部门。下面就ELISA在肉制品快速检测方面的应用作一介绍。
1、 ELISA的基本原理:
     酶联免疫吸附法(The enzyme-linked immunosoebent assay,ELISA)是以抗原与抗体的特异性反应为基础再加上酶与底物的特异性反应使反应的灵敏度放大的一种技术。可以对抗原或者抗体进行定性,也可以通过酶与底物的反应产生颜色,借助吸光度值来进行定量。
 由于酶促反应的放大作用使反应的灵敏度大大提高,同时,提高反应物的利用率,适合工业化和快速检测的应用。
2、 ELISA的方法
     酶免疫测定发可分为非均相免疫测定法。均相酶联免疫发是将抗原附着于固相载体上,其中直接发是用酶标记的抗原测抗体,间接法是将利用特殊的标记的前抗体和二抗抗体进行检测。非均相酶联免疫也可以为夹心法抗体和捕获法,是利用两个分开的抗体作为反应物,其一是附着于固相载体用来捕获抗原,第二个抗体是用于检测,酶联免疫可用于检测抗原,或用抗原分析抗体。
     ELISA方法的分析至今无法统一的标准,常用的测定方法有三类,间接法测抗体,双抗体夹心法测抗原,竞争法测抗原。前两种方法主要用于测定抗体和大分子抗体,适用于临床诊断哂纳感,而竞争法是测定小分子抗原的方法,因而尤其适用于食品安全检测。
     另外还有,双抗体夹心法测抗原或抗体,间接法测抗体,双位点一步法,捕获法测1gG抗体,ABS(avidin biotin system)-ELISA法,PCR—ELISA法,斑点免疫酶结合实验(DIA)等。
3.ELISA在肉制品检测中应用:
3.1兽药残留的检测:
     以人工合成的氯霉素-牛血清白蛋白(CAP-BSA)为包被抗原,氯霉素(CAP)为竞争半抗原用间接竞争ELISA法测定动物性食品中的氯霉素含量,最适检测范围为1-100ug/1,最小检测量为0.1ug/1。
     以ELISA方法测定检测动物源性食品中的四环素类抗生素残,测定下线为150ng/kg,其精密度和灵敏度符合国家要求,同时检测速度快(4h左右出结果)适合进行快速检测
     盐酸克伦特罗(Clenbuterol Hydrochloride,CL),又称为瘦肉精,是一种()-肾上腺素能激动剂,做为营养重分配剂用于改变动物的肌肉和脂肪的沉积,提高生产性能。其在肉制品中的残留会中毒反应。应用ELISA的方法检测其残留,精确度和灵敏度高,成本低,且速度快,前处理简便,比较适用于快速检测。
     利用酶联免疫方法测定动物性食品中的( )类药物的残留,Ostermaier,何继红,彭会建等的实验显示,利用ELISA对

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