星网传媒中心旗下网站:中国专业代写网 论文发表网 职称论文网
网站地图   帮助中心   设为主页   RSS订阅   
论文发表刊物 论文写作论文发表 付款方式 提交订单 客服中心 付费论文 合作加盟
当前位置: 代写网论文资料->农林学科->农业科技论文 → 桑叶中多糖和总黄酮的含量测定
代写论文

桑叶中多糖和总黄酮的含量测定

作者:代写论文  来源:http://www.starlunwen.com/  发布时间:2011-05-06 00:29:38

本文由星论文网提供,星论文网提供资料均为独家发行,因水平高而被多家网站争先转载,转载请注明出处:http://www.starlunwen.com/article/html/list9-1.html

桑叶(Mulberry leaves)异名铁扇子,为桑科(Moraceae)桑属植物桑(Morus alba L.)的叶[1]。初霜后采收,除去杂质,晒干。桑叶甘、苦、寒。归肺、肝经。具有疏散风热,清肺润燥,清肝明目的作用。用于风热感冒,肺热燥咳,头晕头痛,目赤昏花,收载于2010版中国药典(一部)[2]。近年来国内外很多研究结果表明桑叶具有很好的降血糖功能,在临床常用桑叶或桑叶为主的处方治疗糖尿病,并取得满意效果[3],现代药理研究证明桑叶可以抑制血糖上升,防治和治疗糖尿病[4-7]。桑叶中含有黄酮及其苷、生物碱、多糖、挥发油、各种氨基酸、微量元素等[8],成分比较复杂,黄酮类成分是主要有效成分之一[9]。多糖作为一种生物活性物质,在诸多方面有着重要作用,特别在医学方面应用更为广泛。但目前对桑叶中多糖的研究甚少,因而桑叶的许多潜在价值并没有被人们充分认识。笔者采用分光光度法首次测定了不同提取方法中桑叶多糖和总黄酮含量,为桑叶资源的合理开发利用提供科学依据。

星网文化传媒中心( http://www.starlunwen.com/),是一个专门从事期刊推广、农业论文发表农业论文代写指导的机构,转自[星论文网]  www.starlunwen.com
本站优势:
(1)快速审稿。普通国家级省级刊物审稿1-2天,核心期刊审稿7-15天。
(2)多种刊物选择,避免耽误时间。
(3)所选刊物全部是正规刊物,知网和新闻出版总署可查。
(4)省去邮局汇款、打印回执等繁杂手续,直接银行汇款。版面费可开正规发票。
 
陈老师在线QQ:67684029  电话:13550389444  咨询/投稿E-mail:starlunwen@vip.qq.com
杨老师在线QQ:61771950  电话:028-80885761 咨询/投稿E-mail:starlunwen001@vip.qq.com
邓老师在线QQ:61771951  电话:028-80885762 咨询/投稿E-mail:starlunwen002@vip.qq.com
  
  1 仪器和材料
  
  BUCHI旋转蒸发仪(瑞士BUCHI),JA1203N型电子天平(上海精密科学仪器有限公司),SXT-06型索氏提取器(上海),KQ-250B型超声清洗机(昆山市超声仪器有限公司),UV-1700分光光度计(日本岛津),TDL-5离心机(上海安亭科学仪器厂)等。
  芦丁标准品购自中国药品生物制品检定所,葡萄糖购自上海生物制品研究所,乙醇、氢氧化钠、硝酸铝、亚硝酸钠、葡萄糖、苯酚、浓硫酸、石油醚、三氯醋酸、正丁醇、三氯甲烷等。以上试剂均为分析纯。
  桑叶由湖北省咸宁市中药材公司提供,经鉴定为桑科植物桑(Morus alba L.)的干燥叶。
  
  2 方法和结果
  
  2.1 标准品溶液的制备
  2.1.1 芦丁对照品溶液 精密称取120℃干燥至恒重的芦丁对照品为19.84mg,加85%乙醇溶解,定容至100ml容量瓶中,摇匀,制成0.1984mg/ml的芦丁对照品溶液。
  2.1.2 葡萄糖对照品溶液 精密称取105℃干燥至恒重的葡萄糖对照品50.0mg于50ml容量瓶中,加水溶解至刻度,摇匀,即为葡萄糖对照品溶液。
  2.2 供试品溶液的制备
  2.2.1 超声波法提取黄酮及多糖 精密称取研碎的桑叶5g,置100ml锥形瓶中,加85%乙醇100ml,超声提取3次,每次30min。过滤,并用少量85%乙醇多次洗涤滤渣,合并提取液,并转入50ml容量瓶中,以85%乙醇定容,即得待测桑叶总黄酮的供试品液Ⅰ。将提尽黄酮后的残渣置100ml锥形瓶中,加80%乙醇100ml,超声提取20min,以除去单糖及一些苷类。待残渣中的乙醇挥干后,加水100ml超声提取3次,每次30min,过滤,合并3次滤液,然后定容于50ml的容量瓶中,即为待测桑叶多糖的供试品液Ⅱ。
  2.2.2 索氏提取法提取黄酮及多糖 精密称www.starlunwen.com取研碎的桑叶5g,置索氏提取器中,用石油醚(60-90℃) 水浴回流脱脂17h,残渣挥干溶剂后,置100ml锥形瓶中,加85%乙醇100ml,超声提取3次,每次30min。过滤,并用少量85%乙醇多次洗涤滤渣,合并提取液,并转入50ml容量瓶中,以85%乙醇定容,即得待测桑叶总黄酮的供试品液Ⅲ。将提尽黄酮后的残渣置100ml锥形瓶中,加80%乙醇100ml,超声提取20min,以除去单糖及一些苷类。待残渣中的乙醇挥干后,加水100ml超声提取3次,每次30min,过滤,合并3次滤液,然后定容于50ml的容量瓶中,即为待测桑叶多糖的供试品液Ⅳ。
  2.2.3 水煮法提取多糖和总黄酮 取两份5g干桑叶,分别用研钵磨碎(越细越好),加水在恒温水浴锅内浸提60min(两次)。用旋转蒸发仪在69℃下蒸发浓缩至40ml,其中一份为供试品液Ⅴ,另一份加4ml10%三氯醋酸,放置数小时,离心除去不溶物。取上清液浓缩至10ml,加40ml的95%乙醇,经48h冰箱过夜沉淀,取出后,在离心机上12000r/min离心分离15min,去上清液,将沉淀转溶于蒸馏水中,用Sevag法除蛋白,即用三氯甲烷:正丁醇为4:1的混合液,在分液漏斗中萃取3次,每次取混合液10 ml萃取。取上清液,加活性炭脱色处理,再离心15min,去除杂质沉淀。取上清液定容100ml,即为待测桑叶多糖的供试品液Ⅵ。
  2.3 标准曲线的绘制
  2.3.1 黄酮标准曲线的制备 分别取芦丁对照品溶液0.0,0.2,0.5,1.0,2.0,3.0,4.0ml于10ml容量瓶中,加5%亚硝酸钠0.4ml,放置6min,加10%硝酸铝0.4ml,放置6min,再加4%氢氧化钠4ml,加水至刻度,摇匀,放置15min,在510nm处测定其吸光度值;以吸光度值为横坐标,样品浓度为纵坐标,绘制标准曲线,计算得标准回归方程y=8.3483x-0.011,r2=0.9991,在0.003968-0.07936mg/ml范围内呈良好的线性关系。
  2.3.2 多糖标准曲线的制备 分别精密移取葡萄糖对照品溶液 0.5,1.0,1.5,2.0,2.5ml于50ml容量瓶中,加水稀释至刻度,各取1.0ml于10ml比色管中,分别加入5%苯酚溶液1.0ml,摇匀,加入5.0ml浓硫酸(加入浓硫酸时,将移液管口悬于试管口,使浓硫酸垂直冲入液面),立即摇匀,沸水浴加热10min,用冰水冷却至室温,以蒸馏水同法作空白参比,在485nm处测吸光度值(A)。以其吸光度值为横坐标,浓度(C)为纵坐标,绘制标准曲线,得线性方程y=43.925x-0.0113,R2=0.9961,在0.002875-0.014286mg/ml范围内有良好的线性关系。
  2.4 样品含量的测定
  2.4.1 黄酮含量测定 精密吸取黄酮供试品液1.0ml,置25ml容量瓶中,用85%乙醇定容至刻度,再取2.0ml,定容至10ml按硝酸铝显色法显色,测定A值,计算出样品总黄酮含量,结果见表1。
  2.4.2 多糖含量测定 精密吸取多糖供试品液1.0ml,置25ml容量瓶中,用蒸馏水定容至刻度,按2.3.2项下方法显色并测定吸光度值,计算出样品多糖含量,结果见表1。
   表1 桑叶中总黄酮和多糖的含量测定结果
  
  从表1中可以发现,超声提取法、索氏提取法和水煮提取法,这三种方法提取总黄酮和多糖时,超声波法测得的桑叶多糖和总黄酮含量最高,分别为2.49%和1.402%。
  
  3 结论
  分析测定结果表明,超声波法测得的桑叶多糖和总黄酮含量最高分别为2.49%和1.402%。有报道桑叶中多糖类也是主要的活性成分,桑叶总多糖具有良好的降糖效果[10],因此,本文对桑叶多糖和总黄酮的提取方法进行了研究,以便更为充分、更为有效www.starlunwen.com地对桑叶加以利用,为桑叶药材的质量控制提供参考依据。同时也为桑叶降糖作用、抗氧化活性等的机制研究和临床应用提供一定的科学依据,至于各组分中具有哪些具体的化学成分,具有哪些活性,以及有无其他机制等诸多研究课题,有待于进一步深入探讨。
  
  参考文献
  [1] 孟磊,孙莲,张丽静,等.新疆桑叶中总黄酮含量的测定[J].中国民族民间医药杂志,2002(3):176-177.
  [2] 国家药典委员会.中华人民共和国药典.中国医药科技出版社,2010.
  [3] Andallu B,Suryakantham V,Lakshmi Srikanthi B,et al.Effect ofmulberry(Morus indicaL.) therapy on plasma and erythrocytemembrane lipids in patients with type 2 diabetes.Clin Chim Acta,2001,314(1-2):47.
  [4] 陈福君,中岛登,木村郁子,等.桑叶及び桑白皮エキスによるストレプトゾトシン糖尿病マウスの血糖下降效果と作用机序.药学,1995,115(6):476.
  [5] 饭幸澄,樱井宋一,田中顿久.自然发症糖尿病ラット(GKラット)に对する桑叶の抗糖尿病作用.药学,2001,121(5):
  365.
  [6] 李宏,黄金山,胡浩,等.桑叶降糖作用的研究初报.北方蚕业,2002,23(3):19.
  [7] 陈智毅,廖森泰,邹宇晓,等.桑叶颗粒剂对糖尿病的治疗作用研究.蚕业科学,2003,29(2):206.
  [8] 孙莲,杨文菊,刘龙.桑叶挥发油气相色谱-质谱指纹图谱研究[J].中国中药杂志,2009,34(7):879-883.
  [9] 孙敏耀,唐文照,卢霞,等.分光光度法测定不同采收时间桑叶中总黄酮[J].中草药,2004,35(10):1190-1191.
  [10] 陈福君,卢军,张永煜.桑的药理研究(Ⅰ)——桑叶降血糖有效组分对糖尿病动物糖代谢的影响.沈阳药科大学学报,
  1996,13(1):24.
  
  作者简介:张强(1983-),男,吉林长春人,吉林农业大学研究生学院中药学专业08级在读硕士研究生,研究方向:天然药物化学与产品开发。
  通讯作者:张晶(1971-),女,吉林农业大学教授,研究方向:天然产物化学研究与开发。


本文TAGS:
  • 好的评价如果您觉得此论文资料好,就请您
      0%(0)
  • 差的评价如果您觉得此论文资料差,就请您
      0%(0)
文章评论
   评论摘要(共 0 条,得分 0 分,平均 0 分) 查看完整评论

 
Copyright©2000-2010 China Paper Union.星网文化传媒中心版权所有

代写论文总站 www.starlunwen.com|论文发表总站 www.starlunwen.net|代写论文分站www.qk114.net

代写论文客服QQ 客服陈老师:QQ:22848269 论文发表咨询电话 垂询热线:13541216041 论文代写咨询邮箱咨询邮箱:itcy188@163.com
代写论文客服QQ 客服杨老师:QQ:61771950 论文发表咨询电话 垂询热线:02880885761 论文代写咨询邮箱咨询邮箱:starlunwen001@vip.qq.com
代写论文客服QQ 客服邓老师:QQ:61771951 论文发表咨询电话 垂询热线:02880885762 论文代写咨询邮箱咨询邮箱:starlunwen002@vip.qq.com
代写论文客服QQ 客服李老师:QQ:17675998 论文发表咨询电话 垂询热线:02889988872 论文代写咨询邮箱咨询邮箱:starlunwen003@vip.qq.com
代写论文网联系地址联系地址: 四川大学望江校区 成都市一环路南一段24号 邮编: 610065
常年法律顾问支持:四川川达律师事务所  网站合法性备案号:苏ICP备10034823号


论文代写工商信誉 

代写论文网站信誉评估

本中心80余在校老师竭诚为您提供代写毕业论文,代写硕士论文,代写mba论文,代写英语论文代写医学论文等各类代写代发论文,论文代写,论文发表服务